实验目的：
识别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌四大类微生物的菌落特征。

（1）细菌和真菌培养的一般方法：
①配置培养基：培养基的选取、制备（制备的注意事项）。
②高温灭菌，防止其他细菌侵入影响实验。
③为它接种。
④在恒温箱中培养。
（2）细菌的菌落比较小，表面光滑或黏稠，或粗糙干燥。真菌的菌落一般比细菌菌落大几倍到几十倍。霉菌形成的菌落常呈绒毛状、絮状或蜘蛛网状，有时还呈现红、褐、绿、黑、黄等不同的颜色。

观察实验：
一、观察内容：
1．观察已知菌的菌落的形态、大小、色泽、透明度、致密度和边缘等特征。
2．根据菌落的形态特征判断未知菌的类别。

二、实验材料和用具：
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、粘红酵母、热带假丝酵母、细黄链霉菌、灰色链霉菌、黑曲霉、产黄青霉、球孢白伍菌等细菌的斜面菌种。牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基、高氏1号培养基、无菌水。接种环、接种针、酒精灯、无菌培养皿多套、电热恒温箱。

三、操作步骤
(一)制备已知菌的单菌落
1．制备平板将已融化的无菌培养基待冷却至50℃左右，分别制备牛肉膏蛋白胨培养基平板、马铃薯蔗糖培养基平板和高氏1号培养基平板各一皿。
2．制备菌悬液或孢子悬液在培养好的斜面菌种管内加入5mL无菌水，制成菌悬液后备用。
3．制备单菌落通过平板划线法获得细菌、酵母菌和放线菌的单菌落。用三点接种法获得霉菌的单菌落。细菌于37℃恒温培养24～48h，酵母菌于28℃培养2～3d，霉菌和放线菌置28℃培养5～7d，待长成菌落后，仔细观察四大类微生物菌落的形态特征，并将观察结果记录于表中。
(二)制备未知菌落
l．倒平板
2．接种可用弹土法接种，其要点为：采集校园土壤，待风干磨碎后，可将细土撒在无菌的硬板纸表面，先弹去纸面浮土，然后打开皿盖，便含土的纸面对着平板培养基的表面，用手指在硬板纸背面轻轻一弹即可接种上各种微生物。
3．培养将牛肉膏蛋白胨培养基平板倒置于37℃培养箱中恒温培养2～3d，将马铃薯蔗糖培养基倒置于28℃培养箱中恒温培养3～5d，即可获得未知菌的单菌落。
4．编号从培养好的未知平板中，挑选8个不同的单菌落，逐个编号，根据菌落识别要点区分未知菌落类群，并将判断结果填入表4～2中。
 (三)直接观察菌落直接用实验3中的“土壤稀释分离”获得的单菌落进行观察识别，并将结果填入表4-2中。

四、注意事项观察菌落特点时，要选择分离得很开的单个较大菌落；已知菌落和未知菌落要编好号，请勿随意移动开盖，以免搞混菌号。

五、实验报告
细菌菌落特征：凝胶状、表面较光滑、湿润、与培养基结合不紧密，易挑取，正反颜色一致。
酵母菌菌落特征（与细菌相似)：比细菌大而厚，不透明，表面光滑、湿润、粘稠，易用针挑起。多呈乳白色。
放线菌菌落特征：致密、坚硬、多皱、不易用针挑起，不透明。孢子成熟后，表面粉末状，干燥(常有土腥味)。
霉菌菌落特征：比细菌菌落大，由细菌组成疏松的绒毛状，絮状或蜘蛛网状，有的无固定大小，延至整个培养基中产色素，使菌落显色。

1、区分细菌菌落和真菌菌落。
2、通过观察细菌和真菌的菌落,认识菌落的外观形态。
3、辨别被细菌、真菌感染的食品。

能力要求：了解/识记
课时要求：1
考试频率：易考
分值比重：1